Význam transmisní elektronové mikroskopie v diagnostice infekčních nemocí

Datum: 02.06.2022

Transmisní elektronová mikroskopie (TEM) je na virologii Zdravotního ústavu se sídlem v Ostravě využívána již od roku 2005 a je stále důležitou a nenahraditelnou metodou přímé diagnostiky v mikrobiologii, která umožňuje rychlou detekci infekce na základě zřetelné morfologie.

Transmisní elektronová mikroskopie (TEM) je na virologii Zdravotního ústavu se sídlem v Ostravě využívána již od roku 2005 a je stále důležitou a nenahraditelnou metodou přímé diagnostiky v mikrobiologii, která umožňuje rychlou detekci infekce na základě zřetelné morfologie.

Pomocí elektronové mikroskopie dokážeme poměrně rychle diagnostikovat přítomnost virů a bakterií v klinickém materiálu. Vzhledem k velikosti virů v řádu nanometrů je elektronová mikroskopie jediným způsobem zobrazení virových částic. Nespornou výhodou této neselektivní metody je možnost diagnostiky všech agens přítomných ve vzorku na rozdíl od jiných alternativních a mnohdy vysoce specifických metod přímého průkazu. Tím je tato metoda unikátní, neboť s jejím využitím lze detekovat a zobrazit jakékoliv viry přítomné ve vyšetřovaném vzorku včetně těch, jejichž přítomnost nebyla předpokládána nebo které nejsou dosud známy. Elektronovou mikroskopií lze rovněž identifikovat neznámé viry, které byly vykultivovány na tkáňových kulturách. Elektronový mikroskop poskytuje návaznost a komplexnost mikrobiologické diagnostiky. Je důležitou doplňkovou metodu k ostatním metodám přímé diagnostiky. TEM je jedinou metodou přímého průkazu agens, která v případě pozitivního výsledku poskytuje spolehlivě pravdivý důkaz o existenci virů v klinickém materiálu. Nezastupitelný význam má nejen v diagnostice virů, ale i spirochet a to především rodu Borrelia, které často nalézáme v mozkomíšním moku u pacientů s projevy meningitidy či meningoencefalitidy. Za pozitivní výsledek TEM je považován nález nejen celých spirochet, ale i jejich fragmentů.

Pro zvýšení citlivosti a specifičnosti metody byla na ZÚ se sídlem v Ostravě zavedena imunoelektronová mikroskopie (IEM) s využitím specifických protilátek proti OspA a OspC antigenům (Borrelia Burgdorferi) a protilátek značených zlatem.

  • TEM využívá metody negativního kontrastu, kdy dochází k vizualizaci substrukturálních detailů až do velikosti 2nm.
  • Klinický materiál pro TEM – mozkomíšní mok, kožní léze, stolice, moč, různé laváže, výtěry, bioptický materiál, tkáňové kultury a podobně.
  • Transport vzorků do laboratoře ZÚ se sídlem v Ostravě – odebrané biologické vzorky se uchovávají a transportují při teplotě 2-8 °C.
  • Externí hodnocení kvality - každoroční účast ZÚ se sídlem v Ostravě v External Quality Assessment Scheme (EQA) Kochův Institut, Berlin

Obrázek č. 1 - TEM - Spirocheta v likvoru, zvětšení 80 000× (foto: Pomiklová Markéta, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 2 - TEM - fragment spirochety v likvoru u pacienta s neuroboreliózou, zvětšení 30 000× (foto: Pomiklová Markéta, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 3 - TEM – imunoelektronová mikroskopie, Borrelia Burgdorferi, zvětšení 120 000×  (foto: Pomiklová Markéta, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 4 - TEM - Orthomyxoviry - virus chřipky, buněčná kultura, zvětšení 200 000× (foto: Vidličková Ivana, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 5 - TEM - Rotaviry ve stolici, zvětšení 150 000× (foto: Pomiklová Markéta, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 6 - TEM - Paramyxoviry – viry příušnic, buněčná kultura buněčná kultura, zvětšení 200 000× (foto: Vidličková Ivana, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 7 - TEM - nukleová kyselina paramyxoviru, buněčná kultura, zvětšení 150 000× (foto: Vidličková Ivana, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 8 - TEM - Adenoviry, buněčná kultura, zvětšení 200 000× (foto: Pomiklová Markéta, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 9 - TEM - Herpetické viry, buněčná kultura, zvětšení 200 000× (foto: Pomiklová Markéta, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 10 - TEM - Enteroviry ve stolici, zvětšení 120 000× (foto: Pomiklová Markéta, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 11 - TEM - Caliciviry ve stolici, zvětšení 250 000× (foto: Pomiklová Markéta, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 12 - TEM - Coronavirus – SARS-COV2, buněčná kultura, zvětšení 150 000× (foto: Pomiklová Markéta, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 13 - TEM - virus Toscana, buněčná kultura, zvětšení 250 000× (foto: Vidličková Ivana, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 14 - TEM - Marburg viry, buněčná kultura, zvětšení 120 000× (foto: Vidličková Ivana, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 15 - TEM - Gonokoky,  kultivační půda, zvětšení 20 000× (foto: Pomiklová Markéta, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 16 - TEM – viry žloutenky, buněčná kultura, zvětšení 150 000× (foto: Vidličková Ivana, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 17 - TEM – Polyomaviry, buněčná kultura,  zvětšení 200 000× (foto: Pomiklová Markéta, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 18 - TEM – Retroviry, buněčná kultura, zvětšení 200 000× (foto: Pomiklová Markéta, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 19 - TEM – Orthopoxviry, buněčná kultura, zvětšení 200 000× (foto: Vidličková Ivana, ZÚ Ostrava) Obrázek č. 20 - TEM – Chikungunya viry, buněčná kultura, zvětšení 120 000× (foto: Pomiklová Markéta, ZÚ Ostrava)

Aktuality

 
Easy To Read
Zdravotní ústav se sídlem v Ostravě
Partyzánské náměstí 2633/7, Moravská Ostrava, 702 00 Ostrava,
tel.: 596 200 111, fax: 596 118 661, podatelna@zuova.cz,
Datová schránka: pubj9r8
Web: zuova.cz